Entwicklung monoklonaler Antikörper für Kunden
Entwicklung neuer Antikörper produzierender Zelllinien
Biometec bietet einen stufenweisen Service für die Entwicklung monoklonaler Antikörper produzierender Zellinien (Hybridoma) um es zu erleichtern, die Experimente zu planen und Kosten zu sparen. Gemeinsam kann bei jeder Stufe der Beginn und das Fnde festgelegt werden. Berechnet wird nur die beendete Stufe.
Das Standardprotokoll kann an Ihre Kundenwünsche adaptiert werden.
Standardprotokoll
Stufe 1 - Immunisierung von 3 BALB/c Mäusen mit Ihrem Antigen nach Standardprotokoll
Die Seren der immunisierten Mäuse werden mittels ELISA mit Ihrem Antigen an der festen Phase getestet. Wenn die Mäuse einen guten Antikörpertiter entwickelt haben (meist nach 8 Wochen) wird die Zellfusion der Milzellen der Maus mit dem höchsten Antikörpertiter vorbereitet. Alternativ können wir auch eine in vitro Immunisierung mit toxischen Antigenen durchführen.
Bedarf: 2 mg für die Immunisierung und 3-5 mg für das Screening
Zeit 4-8 Wochen
Preis 1000 Euro einschließlich Fusionsvorbereitung und Tierversuchsgenehmigung
Stufe 2 - Hybridomentwicklung und Screening hinsichtlich spezifischer Zellklone
Splenocyten der Milz der besten Maus werden mit Mausmyelomzellen fusioniert. Die fusionierten Zellen werden in Mikrokulturen von fünf 96-well Platten verteilt. Nach der Hybridzellselktion mit Selektionsmedium werden die Mikrokulturen mit wachsenden Hybridzellen zweimal hinsichtlich Antikörperproduktion mittels spezifischem ELISA getestet. Die Antikörper positiven Klone werden isoliert, vermehrt und zur Sicherheit einmal in flüssigem Stickstoff konserviert. Nun werden die besten 10 stabil Antikörper produzierenden Primärkulturen 2 x konserviert.
Zeit 3-4 Wochen
Preis 2000 Euro
Stufe 3 - Klonierung und Reklonierung
Positive Mikrokulturen werden kloniert und zweimal mittel Grenzverdünnungsmethode rekloniert. Parallel erfolgt zu jedem Zeitpunkt ein spezifischer Antigen-ELISA
Zeit 4-6 Wochen
Preis 2000 Euro für 5 Klone
Stufe 4 - Vermehrung und Kryokonservierung
Prüfung der Rekultivierbarkeit, Isotypbestimmung, Mycoplasmentest
Zeit 2-4 Wochen
Preis 1000 Euro für 5 Klone
Referenzen
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